คลังผลงานวิจัย กรมวิชาการเกษตร
การผลิตแอนติซีรัมของเชื้อไวรัส Potato virus A - printable_version

+- คลังผลงานวิจัย กรมวิชาการเกษตร (https://www.doa.go.th/research)
+-- คลังข้อมูล: รายงานผลงานวิจัยและพัฒนา (https://www.doa.go.th/research/forumdisplay.php?fid=1)
+--- คลังข้อมูล: ผลงานวิจัยและพัฒนา ปี 2556 (https://www.doa.go.th/research/forumdisplay.php?fid=6)
+--- เรื่อง: การผลิตแอนติซีรัมของเชื้อไวรัส Potato virus A (/showthread.php?tid=1268)



การผลิตแอนติซีรัมของเชื้อไวรัส Potato virus A - doa - 05-26-2016

การผลิตแอนติซีรัมของเชื้อไวรัส Potato virus A
สิทธิศักดิ์ แสไพศาล, ชลธิชา รักใคร่ และศรีเมฆ ชาวโพงพาง
กลุ่มวิจัยโรคพืช สำนักวิจัยพัฒนาการอารักขาพืช และมหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ วิทยาเขตบางเขน

         การผลิตแอนติซีรัมของเชื้อไวรัส potato virus A (PVA) ทำการสังเคราะห์ดีเอ็นเอในส่วน coat protein gene (CP) ของ Potato virus A ขนาด 789 คู่เบส (bp) และต่อเชื่อม (ligation) PCR product เข้าสู่พลาสมิดพาหะ (plasmid vector) โดยนำดีเอ็นเอสังเคราะห์ผสมกับเวคเตอร์ pET 101/D-TOPO® (Invitrogen) และทำการคัดเลือกเฉพาะโคลนที่มีชิ้นดีเอ็นเอส่วนของ CP gene ที่ใส่เข้าไปใน vector นำมาทำให้บริสุทธิ์โดยวิธี miniprep และส่งไปตรวจสอบหาลำดับเบสพบว่า มีลำดับนิวคลีโอไทด์ 789 bp หลังจากนั้น subclone ยีนโปรตีนห่อหุ้มอนุภาคของไวรัส PVA-CP เข้าสู่ protein expression vector (pET 200/D-TOPO) และ transform เข้า E. coli Top 10 และขณะนี้กำลังดำเนินการคัดเลือกโคลนที่สามารถสังเคราะห์โปรตีนได้ในเซลล์ของ E. coli BL21 ในอาหาร 2XYT ที่เติมสารปฏิชีวนะ ampicillin 100 มิลลิกรัม/ลิตร และชักนำให้เกิดการสังเคราะห์โปรตีนด้วย Isopropyl-β-D thiogalactopyranoside (IPTG)